腺相关病毒（AAV）被广泛视为体内基因递送的优选载体，因其在基因治疗领域被誉为“黄金载体”。截至2025年1月，全球已有8款基于AAV的基因疗法获得批准，并且有219项相关疗法处于临床研究阶段（数据来源于医药魔方NextPharma），显示出其飞速发展的良好势头。然而，AAV治疗也面临一个重大挑战：患者通常只能接受单次治疗，因为首次注射AAV后产生的免疫反应可能显著影响后续的治疗效果。因此，实现AAV的重复给药已成为基因治疗领域亟待解决的重要瓶颈。

最近，暨南大学的李雯和陈功教授团队在《Molecular Therapy: Methods & Clinical Development》期刊上发表了一篇名为《脑内高剂量AAV注射促进B细胞招募，从而抑制AAV的再给药》的研究，首次系统阐明了高剂量AAV注射引发的免疫反应会明显抑制相同血清型AAV的再次给药，并深入探讨了相关机制及应对策略。

研究背景

在外周组织（如肝脏、肌肉）中应用AAV载体进行基因治疗时，产生的“中和抗体（NAbs）”显著削弱了后续给药的效果，这是造成重复给药受限的主要原因。以往研究由于神经系统存在血脑屏障的特性，缺乏对其免疫屏障功能的清晰认识，有部分文献认为脑内AAV注射不会引发与外周类似的B细胞反应。

研究亮点

本研究揭示了多个关键发现：

1. 高剂量AAV导致淋巴细胞浸润：研究显示，脑实质中高剂量AAV注射后，趋化因子CXCL9和CXCL10的表达显著上调，吸引淋巴细胞进入脑内部。
2. B细胞分泌中和抗体是AAV重复给药的主要障碍：首次注射后，B细胞大量产生中和抗体，压制后续相同血清型AAV的表达效率，特别是在缺乏B细胞的小鼠中，这种抑制并未显著出现，表明B细胞在此过程中扮演关键角色。
3. 更换AAV血清型或降低首次给药剂量有效提升再给药的效果：研究发现，通过更换AAV的血清型或降低首次给药剂量，可以避开已有的中和抗体，从而提高AAV的转导效率。

主要研究结果

研究表明，脑内重复给药的抑制与首次注射的剂量和时间高度相关。只有在首次注射量较高且时间间隔大于14天时，第二次注射才会几乎“零转导”。在注射位点附近也观察到了小胶质细胞和星形胶质细胞的活化，趋化因子的上调为免疫细胞（尤其是B细胞）的入脑创造了条件。

研究结论

本研究清楚地表明，在脑内高剂量AAV注射后，激活的星形胶质细胞上调多种趋化因子，进一步招募B细胞入脑并分泌高滴度的抗AAV中和抗体，导致后续同血清型AAV的给药受到显著抑制。因此，避免在神经系统中触发过强的免疫反应成为基因治疗重复给药设计的重要挑战之一。

展望与意义

对于有“重复给药”需求的脑内基因治疗，建议在治疗的起始阶段评估使用高载量的必要性。应尽可能选择足够且不过量的病毒剂量，在后续治疗中更换血清型，以规避已形成的中和抗体。此外，针对B细胞的免疫调控策略也显得尤为重要。这方面的策略可能借鉴多发性硬化的治疗方案，以提高二次给药效率。针对不同脑区及病毒载体的进一步探索，将有助于优化基因治疗的整体效果。

在人生的旅程中，我们需要科学、创新和耐心来迎接挑战。让人生就是博-尊龙凯时的精神，带领我们不断向前，开创未来的新篇章。