通用细胞冻存试剂盒使用说明书 (BA3309)

一、产品简介

本产品专为各种哺乳动物原代细胞及传代细胞系的冻存保种设计。其复苏后能够有效维持细胞的存活率，并具备优良的储存稳定性和简便的操作方式。

产品组分：通用细胞冻存液 BA3309，100mL

保存条件：-20℃ 避光保存，有效期两年。

注意事项

1. 使用水平离心机进行细胞离心，并设置正确的参数，以避免不当操作影响实验结果。
2. 本产品为无菌材料，使用时请穿戴实验服和一次性手套，并确保无菌操作，以防止微生物污染。
3. 使用前请确认试剂已完全融化并混匀。
4. 尽量确保冻存之前细胞状态良好。

自备材料

细胞冻存材料

• 仪器：水平离心机、细胞计数仪、-80℃冰箱。
• 耗材：细胞冻存管、程序性冻存盒、低吸附枪头。

二、细胞复苏材料

细胞复苏所需材料

• 仪器：水平离心机、水浴锅。
• 试剂：RPMI 1640培养基。
• 耗材：酒精棉球、低吸附枪头、离心管。

使用方法

细胞冻存步骤

1. 在使用前，将通用细胞冻存液完全融化并充分混匀。
2. 通过细胞计数仪计算细胞总数，冻存密度一般为1x10⁶/mL。
3. 离心细胞，弃去上清，保留细胞沉淀。不同细胞类型的离心条件不同，例如人PBMC细胞的离心条件为300xg，5分钟。
4. 根据细胞数量计算所需的冻存液体积，用移液枪吸取冻存液，并轻轻混匀细胞。
5. 将细胞装入细胞冻存管中，并加以标记。注意：必须使用专用的液氮冻存管，切勿使用普通离心管。
6. 细胞冻存管放置于可逐步降低温度的装置中，如程序性冻存盒，并藏于-80℃冰箱中，确保温度下降速度约为1℃/min。24小时后可转移至液氮中以延长保存时间。

细胞复苏步骤

1. 打开恒温水浴锅，设置为37℃，取一离心管，加入5mL RPMI 1640培养基，温浴至37℃，约2-5分钟。
2. 取出冻存管，立即放入水浴锅中快速摇晃，使冻存液迅速融化。
3. 完全融化后，用酒精棉球擦拭冻存管外部以减少污染风险。
4. 迅速打开冻存管，将冻存液一滴一滴地加入温浴好的培养基中，并轻轻摇晃，结束后置于水平离心机中，4℃，300xg离心5分钟。
5. 弃去上清后，加入适量培养基重悬细胞。

关于我们

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